凝毛杜鹃中的酚类化合物(1)
[摘要]利用各种色谱技术和波谱手段，从凝毛杜鹃茎枝乙醇提取物中分离鉴定了8个酚类化合物，分别为凝毛杜鹃素(1)，(2R)-4-(3′，4′-二羟基苯基)-2-丁醇(2)，(-)-杜鹃醇(3)，白色杜鹃素(4)，(+)-异落叶松脂素(5)，(-)-南烛木树脂酚(6)，南烛木树脂酚-9′-O-β-D-吡喃木糖苷(7)，二氢脱氢松柏醇-3a-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(8)。化合物1为新化合物，化合物2，5～8为首次从该植物中分离得到。
[关键词]凝毛杜鹃；酚类化合物；结构鉴定
凝毛杜鹃Rhododendron phaeochrysum Balf.f.et W.W.Smith var.agglutinatum(Balf.f.et Forrest)Chamb.ex Cullen et Chamb为杜鹃花科Ericaceae杜鹃花属Rhododendron植物，产于四川西部、云南西北部和西藏东南部，资源丰富，是一种藏药，可用于治疗肺部疾病、咽喉疾病以及梅毒性炎症等[1]。目前关于该植物化学成分的研究较少，有文献报道从其叶中分离得到了4个酚类化合物[2]。作者对凝毛杜鹃茎枝乙醇提取物的化学成分进行分离，鉴定了8个酚类化合物，其中化合物1为新化合物，化合物2，5～8为首次从该植物中分离得到。
, 百拇医药
1 材料
Autopol IV-T旋光仪(美国鲁道夫公司)；U-2900紫外-可见分光光度计(日本日立公司)；iS5傅立叶变换红外光谱仪(美国Nicolet公司)；Varian Mercury Plus 400 MHz核磁共振仪(美国Varian公司)；Agilent 1100-LC/MSD-SL(美国Agilent Technologies公司)；LTQ-FT-Ultra(美国Thermo Fisher Scientific公司)；Agilent 1200高效液相色谱仪(美国Agilent Technologies公司)；Cosmosil 5C18-MS-Ⅱcolumn(10 mm×150 mm，5 μm；日本Nacalai公司)；Sephadex LH-20(美国GE Health Care)；Diaion HP-20(日本Mitsubishi Chemical公司)；ODS反相柱填料(40 μm，日本YMC公司)；柱色谱硅胶H(200～300 目)和薄层色谱HSGF254硅胶预制板(10～40 μm)均为烟台芝罘黄务硅胶开发试验厂生产。乙腈、甲醇(HPLC级，Adamas-beta公司)，其他试剂均为分析纯(上海莱盈化工有限公司)。显色剂为10%H2SO4乙醇溶液。
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凝毛杜鹃于2012年5月采自云南香格里拉。经中国科学院昆明植物所李新辉博士鉴定为R. phaeochrysum var. agglutinatum的茎枝，凭证标本(TCM 2012-5-1 Hou)保存于复旦大学药学院生药学教研室。
2 提取分离
凝毛杜鹃茎枝粗粉(3.7 kg)在室温下用95%乙醇(80 L)渗漉提取，减压浓缩得浸膏680 g。浸膏用水混悬后，用乙酸乙酯萃取。将乙酸乙酯萃取物(300 g)经Diaion HP-20柱色谱分离，依次用70%和90%乙醇洗脱。将70%乙醇洗脱部分(110 g)进行硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇(100∶1～20∶1～9∶1～5∶1～1∶1)梯度洗脱，TLC检测并合并流份，得到组分Fr.1～Fr.9。Fr.5(5.4 g)经Sephadex LH-20凝胶柱色谱(氯仿-甲醇1∶1)，得到组分Fr.5.1和Fr.5.2。Fr.5.1(3.1 g)经反相ODS柱色谱，以甲醇-水(2∶8～3∶7～4∶6～5∶5～6∶4)洗脱，得到组分Fr.5.1.1～Fr.5.1.10。Fr.5.1.3(800 mg)再经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇(100∶1～50∶1～25∶1～10∶1)洗脱，得到组分Fr.5.1.3.1～Fr.5.1.3.8。其中Fr.5.1.3.4(15 mg)经半制备HPLC(甲醇-水3.3∶6.7，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物2(2.5 mg，tR 28 min)；Fr.5.1.3.7(18 mg)经半制备HPLC(甲醇-水2.0∶8.0，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物6(4.0 mg，tR 31 min)。Fr.5.1.4(300 mg)经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-丙酮(25∶1～15∶1～8∶1)洗脱，得到组分Fr.5.1.4.1～Fr.5.1.4.6。其中Fr.5.1.4.2(45 mg)经半制备HPLC(甲醇-水2.5∶7.5，流速1 mL·min-1，紫外检测波长 210 nm)得到化合物3(20.0 mg，tR 25 min)；Fr.5.1.4.6(50 mg)经半制备HPLC(甲醇-水2.2∶7.8，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物5(4.0 mg，tR 20 min)。Fr.5.1.6(200 mg)经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇(50∶1～30∶1～15∶1)洗脱，得到组分Fr.5.1.6.1～Fr.5.1.6.4。其中Fr.5.1.6.2(20 mg)经半制备HPLC(乙腈-水2.5∶7.5，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物8(3.5 mg，tR 28 min)；Fr.5.1.6.3(30 mg)经半制备HPLC(甲醇-水2.1∶7.9，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物4(12.6 mg，tR 32 min)。Fr.6(4.5 g)经反相ODS柱色谱，以甲醇-水(1.5∶8.5～2∶8～3∶7～4∶6～5∶5)洗脱，得到组分Fr.6.1-Fr.6.4。Fr.6.1(1.1 g)经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇(10∶1～8∶1～6∶1)洗脱，得到组分Fr.6.1.1～Fr.6.1.5。Fr.6.1.3(21 mg)经半制备HPLC(甲醇-水1.8∶8.2，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物7(5.8 mg，tR 36 min)。Fr.6.1.4(30 mg)经半制备HPLC(乙腈-水1.7∶8.3，流速1 mL·min-1，紫外检测波长 210 nm)得到化合物1(14.4 mg，tR 43 min)。, http://www.100md.com(孙吉庆 雷春 侯爱君)
[关键词]凝毛杜鹃；酚类化合物；结构鉴定
凝毛杜鹃Rhododendron phaeochrysum Balf.f.et W.W.Smith var.agglutinatum(Balf.f.et Forrest)Chamb.ex Cullen et Chamb为杜鹃花科Ericaceae杜鹃花属Rhododendron植物，产于四川西部、云南西北部和西藏东南部，资源丰富，是一种藏药，可用于治疗肺部疾病、咽喉疾病以及梅毒性炎症等[1]。目前关于该植物化学成分的研究较少，有文献报道从其叶中分离得到了4个酚类化合物[2]。作者对凝毛杜鹃茎枝乙醇提取物的化学成分进行分离，鉴定了8个酚类化合物，其中化合物1为新化合物，化合物2，5～8为首次从该植物中分离得到。
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1 材料
Autopol IV-T旋光仪(美国鲁道夫公司)；U-2900紫外-可见分光光度计(日本日立公司)；iS5傅立叶变换红外光谱仪(美国Nicolet公司)；Varian Mercury Plus 400 MHz核磁共振仪(美国Varian公司)；Agilent 1100-LC/MSD-SL(美国Agilent Technologies公司)；LTQ-FT-Ultra(美国Thermo Fisher Scientific公司)；Agilent 1200高效液相色谱仪(美国Agilent Technologies公司)；Cosmosil 5C18-MS-Ⅱcolumn(10 mm×150 mm，5 μm；日本Nacalai公司)；Sephadex LH-20(美国GE Health Care)；Diaion HP-20(日本Mitsubishi Chemical公司)；ODS反相柱填料(40 μm，日本YMC公司)；柱色谱硅胶H(200～300 目)和薄层色谱HSGF254硅胶预制板(10～40 μm)均为烟台芝罘黄务硅胶开发试验厂生产。乙腈、甲醇(HPLC级，Adamas-beta公司)，其他试剂均为分析纯(上海莱盈化工有限公司)。显色剂为10%H2SO4乙醇溶液。
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凝毛杜鹃于2012年5月采自云南香格里拉。经中国科学院昆明植物所李新辉博士鉴定为R. phaeochrysum var. agglutinatum的茎枝，凭证标本(TCM 2012-5-1 Hou)保存于复旦大学药学院生药学教研室。
2 提取分离
凝毛杜鹃茎枝粗粉(3.7 kg)在室温下用95%乙醇(80 L)渗漉提取，减压浓缩得浸膏680 g。浸膏用水混悬后，用乙酸乙酯萃取。将乙酸乙酯萃取物(300 g)经Diaion HP-20柱色谱分离，依次用70%和90%乙醇洗脱。将70%乙醇洗脱部分(110 g)进行硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇(100∶1～20∶1～9∶1～5∶1～1∶1)梯度洗脱，TLC检测并合并流份，得到组分Fr.1～Fr.9。Fr.5(5.4 g)经Sephadex LH-20凝胶柱色谱(氯仿-甲醇1∶1)，得到组分Fr.5.1和Fr.5.2。Fr.5.1(3.1 g)经反相ODS柱色谱，以甲醇-水(2∶8～3∶7～4∶6～5∶5～6∶4)洗脱，得到组分Fr.5.1.1～Fr.5.1.10。Fr.5.1.3(800 mg)再经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇(100∶1～50∶1～25∶1～10∶1)洗脱，得到组分Fr.5.1.3.1～Fr.5.1.3.8。其中Fr.5.1.3.4(15 mg)经半制备HPLC(甲醇-水3.3∶6.7，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物2(2.5 mg，tR 28 min)；Fr.5.1.3.7(18 mg)经半制备HPLC(甲醇-水2.0∶8.0，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物6(4.0 mg，tR 31 min)。Fr.5.1.4(300 mg)经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-丙酮(25∶1～15∶1～8∶1)洗脱，得到组分Fr.5.1.4.1～Fr.5.1.4.6。其中Fr.5.1.4.2(45 mg)经半制备HPLC(甲醇-水2.5∶7.5，流速1 mL·min-1，紫外检测波长 210 nm)得到化合物3(20.0 mg，tR 25 min)；Fr.5.1.4.6(50 mg)经半制备HPLC(甲醇-水2.2∶7.8，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物5(4.0 mg，tR 20 min)。Fr.5.1.6(200 mg)经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇(50∶1～30∶1～15∶1)洗脱，得到组分Fr.5.1.6.1～Fr.5.1.6.4。其中Fr.5.1.6.2(20 mg)经半制备HPLC(乙腈-水2.5∶7.5，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物8(3.5 mg，tR 28 min)；Fr.5.1.6.3(30 mg)经半制备HPLC(甲醇-水2.1∶7.9，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物4(12.6 mg，tR 32 min)。Fr.6(4.5 g)经反相ODS柱色谱，以甲醇-水(1.5∶8.5～2∶8～3∶7～4∶6～5∶5)洗脱，得到组分Fr.6.1-Fr.6.4。Fr.6.1(1.1 g)经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇(10∶1～8∶1～6∶1)洗脱，得到组分Fr.6.1.1～Fr.6.1.5。Fr.6.1.3(21 mg)经半制备HPLC(甲醇-水1.8∶8.2，流速1 mL·min-1，紫外检测波长210 nm)得到化合物7(5.8 mg，tR 36 min)。Fr.6.1.4(30 mg)经半制备HPLC(乙腈-水1.7∶8.3，流速1 mL·min-1，紫外检测波长 210 nm)得到化合物1(14.4 mg，tR 43 min)。, http://www.100md.com(孙吉庆 雷春 侯爱君)